REAGEN™ स्ट्रेप्टोमाइसिन एलिसा टेस्ट किट फीड, हनी, किडनी, लिवर, मांस (बीफ, चिकन और पोर्क), दूध, सीरम और मूत्र में स्ट्रेप्टोमाइसिन और डायहाइड्रोस्ट्रेप्टोमाइसिन के मात्रात्मक विश्लेषण के लिए एक प्रतिस्पर्धी एंजाइम इम्यूनो है।
नमूना प्रकार |
पहचान सीमा (एनजी / जी या पीपीबी) |
चारा |
5 |
शहद |
2 |
मांस / जिगर / गुर्दे |
5 |
दूध |
1 |
दूध का पाउडर |
1 |
सीरम / मूत्र |
0.5 |
analytes |
क्रॉस प्रतिक्रियात्मकता (%) |
स्ट्रेप्टोमाइसिन |
100 |
उच्च वसूली (75- 115%) के साथ विभिन्न नमूनों के लिए रैपिड (10 - 30 मिनट), और कार्बनिक अभिकर्मक-मुक्त निष्कर्षण विधियाँ।
उच्च संवेदनशीलता (0.05 एनजी / जीपी या पीपीबी) और कम पहचान सीमा (मांस और दूध के लिए 1 एनजी / जीपी या पीपीबी)।
उच्च प्रजनन क्षमता।
एक त्वरित एलिसा परख (नमूनों की संख्या की परवाह किए बिना 2 घंटे से कम)।
विधि एक प्रतिस्पर्धी वर्णमिति एलिसा परख पर आधारित है।स्ट्रेप्टोमाइसिन एंटीबॉडी को प्लेट कुओं में लेपित किया गया है।विश्लेषण के दौरान, स्ट्रेप्टोमाइसिन-हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज संयुग्म के साथ नमूना जोड़ा जाता है।यदि स्ट्रेप्टोमाइसिन अवशेष नमूने में मौजूद है, तो यह स्ट्रेप्टोमाइसिन एंटीबॉडी के लिए प्रतिस्पर्धा करेगा, जिससे स्ट्रेप्टोमाइसिन-एचआरपी को कुएं से जुड़े एंटीबॉडी से बंधने से रोका जा सकेगा।एचआरपी सब्सट्रेट (टीएमबी) के अलावा परिणामी रंग की तीव्रता, नमूने में स्ट्रेप्टोमाइसिन अवशेष एकाग्रता के साथ एक विपरीत संबंध है।
निम्नलिखित के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा कि अलग अलग स्ट्रिप्स लेबल और निम्नलिखित उदाहरण के रूप में अभिकर्मकों:
अंग |
प्रतिक्रिया के अनुसार आयतन |
24 प्रतिक्रियाएँ |
स्ट्रेप्टोमाइसिन एंटीबॉडी # 1 |
50 एम.एल. |
1.2 एमएल |
एचआरपी-संयुग्मित एंटीबॉडी # 2 |
50 एम.एल. |
1.2 एमएल |
1 एक्स धो समाधान |
2.0 एमएल |
48 एमएल |
बफ़र बंद करो |
100 एमएल |
2.4 एम.एल. |
टीएमबी सबस्ट्रेट |
100 एमएल |
2.4 एम.एल. |
अलग-अलग कुओं में डुप्लिकेट में प्रत्येक स्ट्रेप्टोमाइसिन मानकों के 50uL जोड़ें (एफ कम सांद्रता से उच्च सांद्रता तक के क्रम में ही प्लेट में मानक जोड़ें)।
प्रत्येक नमूने के 50 यूएल को अलग-अलग नमूना कुओं में डुप्लिकेट में जोड़ें।
एचआरपी-संयुग्मित एंटीबॉडी # 2 के 50 यूएल और प्रत्येक अच्छी तरह से 50 एमएल एंटीबॉडी # 1 जोड़ें, धीरे से 1 मिनट के लिए प्लेट को धीरे से हिलाकर अच्छी तरह मिलाएं।
कमरे के तापमान पर 30 मिनट के लिए प्लेट सेते हैं (20 - 25 ° C / 68 - 77 ° F) (?? एफऊष्मायन के दौरान सीधे धूप और ठंड बेंच से बचें।ऊष्मायन करते समय माइक्रोएटर प्लेट को कवर करने की सलाह दी जाती है)।
प्लेट को 250 बार 1X धो समाधान के uL के साथ धोएं।अंतिम धोने के बाद, प्लेट को उल्टा कर दें और धीरे से प्लेट को कागज के तौलिये पर सुखाएं (एफप्लेट धोने के तुरंत बाद अगला चरण करें।काम के चरणों के बीच प्लेट को हवा में सूखने की अनुमति न दें)।
TMB सब्सट्रेट के 100 uL जोड़ें।सब्सट्रेट जोड़ने के तुरंत बाद प्रतिक्रिया का समय।धीरे से ऊष्मायन करते हुए 1 मिनट के लिए प्लेट को धीरे से हिलाते हुए घोल मिलाएं (?? एफकिसी भी संभावित संदूषण से बचने के लिए किसी भी सब्सट्रेट को मूल कंटेनर में वापस न रखें।रंग को प्रदर्शित करने वाला कोई भी सब्सट्रेट समाधान खराब होने का संकेत है और इसे छोड़ दिया जाना चाहिए।ऊष्मायन करते समय माइक्रोएटर प्लेट को कवर करने की सलाह दी जाती है)।
कमरे के तापमान (15 - 25 डिग्री सेल्सियस / 68 - 77 ° एफ) पर 15 मिनट के लिए ऊष्मायन के बाद, एंजाइम प्रतिक्रिया को रोकने के लिए स्टॉप बफर के 100 यूएल जोड़ें।
450 एनएम तरंग दैर्ध्य के साथ एक प्लेट रीडर पर स्टॉप बफर के अलावा के बाद जितनी जल्दी हो सके प्लेट पढ़ेंएफ पढ़ने से पहले, प्लेट के तल पर एक लिंट-फ्री वाइप का उपयोग करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि कोई नमी या उंगलियों के निशान रीडिंग के साथ हस्तक्षेप न करें)।
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